Для подтверждения болезни вирусной природы рыб заражают фильтратами, содержащими вирусы. Для этого в асептических условиях берут органы и ткани от живых рыб и готовят суспензию на физиологическом растворе, растворе Хенкса или других средах с рН 7,4-7,6. Суспензию центрифугируют 15-20 мин при 3000 об/мин или фильтруют через бумажные фильтры, а затем через бактериальные фильтры (керамические, асбестовые, коллоидные, мембранные). Чаще используют фильтры Зейтца или мембранные № 1.
Для заражения не берут первые порции фильтрата. Рекомендуется (особенно при болезнях невыясненной этиологии) заражать несколько групп рыб различными способами как профильтрованным, так и нефильтрованным материалом. Если после первичного заражения рыба не заболевает, используют метод "слепых" пассажей. Для этого через 6-8 дней после первого заражения рыбу убивают, из ее органов и тканей готовят суспензию и фильтрат, которыми и заражают следующую группу рыб. Всего проводят 2-3 таких "слепых" пассажа.
Заболевание рыб при введении им фильтрата указывает на его заразность и позволяет предположить вирусную этиологию инфекции, которую окончательно доказывают выделением чистой культуры вируса и изучением его в культуре тканей рыб. При постановке биологической пробы для диагностики микозов используют пативный материал, в котором содержится возбудитель на всех" стадиях развития, или выращивают патогенные грибы на специальных питательных средах до стадий, пригодных для заражения.
Дозу вводимого патологического материала в каждом конкретном случае определяют титрованием на восприимчивых рыбах. За летальную дозу принимают такое количество бульонной или агаровой культуры, фильтрата в определенном разведении, спор и т. д., которое вызывает гибель 50% зараженных рыб.
Результаты биологической пробы зависят от правильно выбранного метода введения заразного начала. В ихтиопатологии наиболее часто заразное начало вводят внутрибрюшинно, а также пероралыю, подкожно, внутримышечно. Иногда патологический материал втирают в скарифицированные ткани.