Патологический материал должен быть свежим, полученным от живых или только что уснувших рыб.
    Для подтверждения бактериальной природы болезни, вызванной патогенными штаммами
     A. punctata, применяют культуры, выделенные при бактериологическом исследовании. Для этого берут пять здоровых карпов весом 100-200 г из благополучных водоемов. Рыбам вводят двухсуточную бульонную культуру. A. punctata в дозе 0,2 мл и наблюдают за ними 10 дней. Температура в аквариуме должна быть не ниже 18-20°.
     Биологическая проба считается положительной, если карпы заболевают и погибают через 1-3 суток после введения бульонной культуры, а болезнь характеризуется увеличением брюшка, покраснением кожного покрова, ерошением чешуи, покраснением и выпячиванием ануса, кровенаполнением внутренних органов. Из крови сердца, печени, почек погибших рыб делают посевы на МПБ, МПА. Полученные культуры изучают бактериологическим, микроскопическим и серологическим методами.
     При заражении рыб бактериями берут культуры среднего возраста. Очень старые или очень молодые для биопробы не пригодны (бактерии, длительно хранившиеся на средах, изменяют свои вирулентные свойства). Музейные штаммы перед опытом пассируют через восприимчивых рыб. Использовать их для биопробы можно только после восстановления исходных свойств.